1　范圍
　　本方法規(guī)定了使用氣相色譜–質(zhì)譜法測(cè)定化妝品中鄰苯二甲酸二正戊酯（DnPP）、鄰苯二甲酸二異戊酯（DIPP）、鄰苯二甲酸戊基異戊酯（DnIPP）、鄰苯二甲酸二（2-甲氧乙基）酯（DMEP）、鄰苯二甲酸丁芐酯（BBP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（DEHP）以及1,2-苯基二羧酸支鏈和直鏈二戊基酯的含量。其中，1,2-苯基二羧酸支鏈和直鏈二戊基酯有3種同分異構(gòu)體，分別為DnIPP、DnPP、DIPP，文中涉及該組分含量時(shí)，是指DnIPP、DnPP、DIPP3種同分異構(gòu)體含量的總和，可以使用本方法對(duì)3種同分異構(gòu)體進(jìn)行測(cè)定，3種組分之和即為其含量。
　　本方法適用于粉、霜、露、膏、乳、油、液類化妝品中鄰苯二甲酸二正戊酯、鄰苯二甲酸二異戊酯、鄰苯二甲酸戊基異戊酯、鄰苯二甲酸二（2-甲氧乙基）酯、鄰苯二甲酸丁芐酯、鄰苯二甲酸二丁酯、鄰苯二甲酸二（2-乙基己基）酯以及1,2-苯基二羧酸支鏈和直鏈二戊基酯含量的測(cè)定。
　　
　　本標(biāo)準(zhǔn)的濃度適用范圍以及方法的檢出限、定量檢出下限如表1所示。
　　

　　表1　鄰苯二甲酸酯類化合物的檢出限和檢出濃度

	DIPP	DMEP	DnIPP	DnPP	BBP	DBP	DEHP
濃度適用范圍（mg/Kg）	1.0–20					5.0–20
檢出限（3s, mg/Kg）	1.0	1.0	1.0	1.0	1.0	5.0	5.0
定量檢出下限（10s, mg/Kg）	3.5	3.5	3.5	3.5	3.5	17.0	17.0

2　原理

　　試樣經(jīng)二氯甲烷超聲提取后，使用硅膠–中性氧化鋁混合填充的固相萃取小柱進(jìn)行凈化，正己烷–乙酸乙酯（1:1，v:v）為淋洗液，濃縮后經(jīng)氣相色譜分離、質(zhì)譜檢測(cè)器測(cè)定，使用保留時(shí)間、待測(cè)組分特征離子豐度比雙重模式進(jìn)行定性，外標(biāo)法對(duì)各組分定量離子峰面積進(jìn)行定量。
　　3　試劑及材料
　　除特別說明外，所有試劑均為分析純；水為符合GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水。
　　3.1　鄰苯二甲酸酯類標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：純度高于97.0%。各待測(cè)物質(zhì)的信息如表2。

表2 鄰苯二甲酸酯的種類列表

序號(hào)	鄰苯二甲酸酯類名稱	英文名稱及縮寫	CAS NO.	化學(xué)分子式
1	鄰苯二甲酸戊基異戊酯	Di-n-iso-pentyl phthalate, DnIPP		C18H26O4
2	鄰苯二甲酸二正戊酯	Di-n-pentyl phthalate, DnPP	131-18-0	C18H26O4
3	鄰苯二甲酸二異戊酯	Di-iso-pentyl phthalate, DIPP	605-50-5	C18H26O4
4	鄰苯二甲酸丁芐酯	Butyl benzyl phthalate, BBP	85-68-7	C19H20O4
5	鄰苯二甲酸二(2-乙基己基)酯	Di(2-ethylhexyl) phthalate, DEHP	117-81-7	C24H38O4
6	鄰苯二甲酸二（2-甲氧乙基）酯	Di(2-methoxyethyl) phthalate, DMEP	117-82-8	C14H18O6
7	鄰苯二甲酸二丁酯	Dibutyl phthalate, DBP	84-74-2	C16H22O4

　　3.2　正己烷：色譜純。
　　3.3　乙酸乙酯：色譜純。
　　3.4　二氯甲烷：色譜純。
　　3.5　 硅膠：100～200目，使用前于160 ℃下烘12 h。
　　3.6　 中性氧化鋁：100～200目，使用前于180 ℃下烘12 h。
　　3.7　鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)溶液
　　3.7.1　單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱10.0 mg各鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)品于10 mL容量瓶中，分別加入少量正己烷溶解，定容至刻度，溶液濃度為1000 mg/L。分別將各標(biāo)準(zhǔn)溶液轉(zhuǎn)移到安瓿瓶中于4℃保存。單標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液保存時(shí)間為12個(gè)月。
　　3.7.2　混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液：取一定量各標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用正己烷稀釋成混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液，混合標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為100 mg/L。將混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液轉(zhuǎn)移到安瓿瓶中于4℃保存。混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液保存時(shí)間為6個(gè)月。

　　3.7.3　混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：用正己烷將一定量的混合標(biāo)準(zhǔn)中間溶液配制成系列不同濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。將混合標(biāo)準(zhǔn)工作液轉(zhuǎn)移至安瓿瓶中于4℃保存。混合標(biāo)準(zhǔn)工作液保存時(shí)間為3個(gè)月。

　　4　儀器和設(shè)備
　　4.1　氣相色譜-質(zhì)譜儀。
　　4.2　分析天平：感量0.0001 g。
　　4.3　超聲波振蕩器。
　　4.4　離心機(jī)。
　　4.5　氮?dú)獯祾哐b置。
　　4.6　玻璃固相萃取柱：內(nèi)徑1 cm，管長(zhǎng)10 cm。
　　4.7　圓底螺口玻璃離心管：50 mL。
　　4.8　濾膜：0.45 μm有機(jī)相濾膜。

　　4.9　K-D濃縮瓶：30 mL。

　　5　分析步驟
　　5.1　提取及凈化
　　稱取0.5 g試樣（精確到0.001 g），置于50 mL圓底螺口玻璃離心管（4.7）中，加入10.0 mL二氯甲烷，密封，于40～50℃范圍內(nèi)超聲萃取15 min，2000 r/min離心5 min后，移取有機(jī)相；重復(fù)上述操作，合并兩次萃取液于30 mL K-D濃縮瓶（4.9）中。以下按照化妝品類型進(jìn)行不同的操作：
　　1）對(duì)于液態(tài)的化妝品，如爽膚水、啫喱水、香水等，將萃取液用氮吹濃縮至近干，并用8 mL正己烷分三次淋洗K-D濃縮瓶?jī)?nèi)壁，最后用正己烷定容至1.0 mL，過0.45 μm濾膜，供GC-MS測(cè)定。
　　
　　2）對(duì)于粉、露、霜、膏、油等的化妝品，如洗發(fā)水、沐浴露、染發(fā)劑、指甲油、胭脂、粉餅等，將萃取液用氮吹濃縮至近干，并用8 mL正己烷分三次淋洗K-D濃縮瓶?jī)?nèi)壁，加入0.5 mL正己烷，使用以下步驟對(duì)樣品進(jìn)行凈化：
　　稱取0.8 g硅膠和1.2 g中性氧化鋁（2:3，m/m），充分混勻后用干法裝入玻璃固相萃取小柱，輕敲至實(shí)。使用前對(duì)小柱進(jìn)行預(yù)淋洗，預(yù)淋洗液為正己烷和乙酸乙酯的混合液（1:1，v/v），預(yù)淋洗體積為5 mL，棄去淋洗液。將上述濃縮后的萃取液轉(zhuǎn)移至硅膠–中性氧化鋁混裝的固相萃取小柱，并用1 mL正己烷分兩次洗滌器皿，洗滌液轉(zhuǎn)移至固相萃取小柱。待樣液過柱后，用20.0 mL正己烷-乙酸乙酯混合液（1:1，v/v）將目標(biāo)物洗脫，流速為2.0 mL/min，用30 mL K-D濃縮瓶（4.9）收集洗脫液，氮?dú)獯祾摺饪s至近干，濃縮過程中用8 mL正己烷分三次淋洗K-D濃縮瓶?jī)?nèi)壁，最后用正己烷定容至1.0 mL，供GC-MS測(cè)定。
　　5.2　空白實(shí)驗(yàn)
　　除不稱取試樣外，均按上述步驟進(jìn)行。
　　5.3　測(cè)定
　　5.3.1　氣相色譜-質(zhì)譜條件
　　由于測(cè)試條件取決于所使用儀器，因此不能給出色譜分析的通用參數(shù)。設(shè)定的參數(shù)應(yīng)保證色譜測(cè)定時(shí)被測(cè)組分與其他組分能夠得到有效的分離，以下參數(shù)可供參考：
　　進(jìn)樣口溫度300℃。載氣為氦氣（純度≥99.999%），恒流方式，流速1.0 mL/min。色譜柱為DB-35 MS柱，30 m × 0.25 mm（i.d.）× 0.25 μm，或相當(dāng)者；柱升溫程序?yàn)椋撼跏紲?00 ℃，保持0.5 min后以30 ℃/min升至300 ℃，保持2.0 min至待測(cè)組分全部流出。進(jìn)樣量1.0 μL。
　　離子源為EI源，電離能量70eV。色譜–質(zhì)譜接口溫度280℃，離子源溫度230℃，四級(jí)桿溫度150℃。溶劑延遲時(shí)間6.0 min。測(cè)量方式為全掃描/選擇離子監(jiān)測(cè)（Scan/SIM）同時(shí)采集模式。各待測(cè)組分的定性、定量離子如表3所示。

表3 鄰苯二甲酸酯的保留時(shí)間及特征離子

序號(hào)	名稱	保留時(shí)間（min）	選擇離子（m/z）	豐度比
1	DBP	6.81	*149，150，223	100 : 10 : 6
2	DIPP	7.10	*149，237，207	100 : 11 : 4
3	DMEP	7.16	*59，58，149，207	100 : 69 : 25 : 16
4	DnIPP	7.25	*149，237，207	100 : 10 : 7
5	DnPP	7.40	*149，237，207	100 : 7 : 3
6	BBP	8.52	*149，206，238	100 : 26 : 4
7	DEHP	8.65	*149，167，279	100 : 33 : 3

　注：選擇離子中帶“*”的為定量離子

　　5.3.2　氣相色譜-質(zhì)譜分析及結(jié)果確證
　　根據(jù)試樣中被測(cè)物質(zhì)含量，選定適宜濃度標(biāo)準(zhǔn)工作液，使待測(cè)樣液中每種鄰苯二甲酸酯的響應(yīng)值均在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)。如果樣液的檢測(cè)響應(yīng)值超出儀器檢測(cè)的線性范圍，可適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行測(cè)定。
　　
　　在5.3.1氣相色譜–質(zhì)譜條件下，鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的參考保留時(shí)間和氣相色譜–質(zhì)譜選擇離子色譜圖見圖1。如果在試樣、標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的選擇離子色譜圖中，在相同保留時(shí)間出現(xiàn)色譜峰，則根據(jù)表3、表4中鄰苯二甲酸酯特征選擇離子豐度指標(biāo)進(jìn)行確證。

圖1　鄰苯二甲酸酯標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)氣相色譜-質(zhì)譜選擇離子色譜圖（0.5 μg/mL）

表4 鄰苯二甲酸酯的特征離子豐度指標(biāo)

名稱	質(zhì)量數(shù)	允許相對(duì)偏差
DBP	150 223	±5% ±10%
DIPP	237 207	±5% ±20%
DMEP	58 149 207	±20% ±10% ±20%
DnIPP	237 207	±5% ±20%
DnPP	237 207	±5% ±20%
BBP	206 238	±5% ±10%
DEHP	167 279	±10% ±10%

　　注：允許相對(duì)偏差為特征離子相對(duì)于定量離子豐度的偏差。
　　　　　　
　　6　結(jié)果計(jì)算
　　試樣中每種鄰苯二甲酸酯含量按（1）式計(jì)算，結(jié)果保留到小數(shù)點(diǎn)后兩位：
　　式中：
　　Wi — 試樣中鄰苯二甲酸酯 i 的含量，單位 mg/Kg；
　　ci1 — 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到萃取液中鄰苯二甲酸酯 i 的濃度，單位 mg/L；
　　ci2 — 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到空白中鄰苯二甲酸酯 i 的濃度，單位 mg/L；
　　V — 待測(cè)樣液定容體積，單位 mL；
　　m — 試樣的質(zhì)量，單位 g。

　　7　精密度
　　在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不大于這兩次測(cè)定值算術(shù)平均值的15%。